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奧林巴斯熒光顯微鏡汞燈介紹

2019-09-02 16:01:56 Pooher Inc. 1061

在大多數熒光顯微鏡應用中,到達眼睛或其他檢測器(如攝像機或光電倍增管)的光子數量通常很低。這是因為大多數熒光染料的量子產率很低(量子產率是樣品發射的量子數與吸收的量子數的比值)。為了產生足夠的激發光強度以提供能夠檢測的發射,需要強大的光源,通常為類似于圖1中示出的示例的?。ㄈ紵鳎?。這些燈用高壓氣體填充,并且應當謹慎處理。

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*常見的燈是汞燃燒器,功率從50瓦到200瓦不等,氙氣燃燒器從75瓦到150瓦不等。圖1中的汞燃燒器燈由兩個密封在高壓下的石英玻璃封套內的電極組成,該封套還含有汞。

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這些光源通常由直流電源供電,以提供足夠的啟動功率來點燃燃燒器(通過電離氣態蒸汽),并以*小的閃爍保持燃燒。電源應該有一個定時器,使您能夠跟蹤燃燒器使用的小時數。如果*過額定壽命使用,弧光燈將失去效率并更可能粉碎。汞燃燒器不能提供從紫外線到紅外線的均勻強度(參見圖2的汞燃燒器的發射光譜)。汞燃燒器的大部分強度都消耗在近紫外線中,強度峰值分別為313,334,365,406,435,546和578納米。在可見光的其他波長處,強度穩定但幾乎不明亮,但仍然可用于藍色激勵。還應該理解,僅僅瓦數不是確定亮度的唯一考慮因素。

熒光燈規格
燈的
類型
XBO 
150W / 1
XBO 
75W / 2
HBO 
200W / 2
HBO 
100W / 2
HBO 
50W / 3
當前DCDCDCDCDC
費率功率(瓦特)1507520010050
光通量(流明)30009501000022001300
光強度(Candella)3001001000260150
平均。亮度(cd / cm)15000400004000017000090000
圓弧尺寸
(以毫米為單位的w×h)
0.50×2.200.25×0.500.60×2.200.25×0.250.20×1.35
壽命(小時)1200400400200200
表格1

另一個重要標準是弧的大小; 包含在物鏡后孔內的弧的單位面積亮度是燃燒器有用亮度的較好測量值。使用該標準,您會注意到表1中列出的三個汞燃燒器,100瓦燃燒器(其他條件相同)是三者中*亮的。在選擇燃燒器時,重要的是燃燒器波長的光譜強度峰值是否與染色試樣的熒光染料的激發要求相匹配。無論何時評估照明系統,都必須考慮整個系統,包括收集器透鏡以及使用孔徑和場光闌來確保科勒照明。

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氙燃燒器在整個可見光譜范圍內的強度比汞燃燒器強得多(見圖3); 它們沒有汞燃燒器特有的非常高的光譜強度峰值。氙燈缺乏紫外線; 它們在紅內部消耗大部分強度,因此使用這種燈需要注意控制熱量。短間隙氙氣燃燒器通常更合乎需要,因為電弧的大小使得其光更容易包含在物鏡的后孔中,從而避免浪費光強。

警告!
汞和氙弧燈在運行過程中需要小心,因為內部氣體壓力非常高,使用過程中會產生極高的熱量,因此有爆炸的危險。切勿在外殼外部點燃燈泡,或在燈泡燃燒時直接觀察燈泡(這可能會導致嚴重的眼睛損傷)。裸露的手指不應該用汞和氙燈來處理,以避免無意中蝕刻石英外殼。只有在燈泡有足夠的時間冷卻后才能更換燈泡。將燈存放在運輸容器中以避免事故。

安裝或更換汞燈或氙弧燈時,始終遵守上述安全規程。

水銀燃燒器壽命200小時; 氙氣燃燒器數百小時。頻繁的開關切換會縮短燈泡的使用壽命。當燃燒器達到其額定壽命時,光譜發射可能會改變,石英外殼會減弱。

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有時使用鎢 - 鹵素燈泡,特別是對于發射出明亮樣品的藍色或綠色激發。它們的輸出在可見光譜范圍內相對均勻(圖4); 它們在近紫外線方面不足并且在紅外線中也具有相對高的強度比例。這些燈不需要昂貴的點火電源,但由低電壓變壓器供電; 在*大額定電壓下使用時,燈泡可持續使用30到50小時。

近年來,越來越多地使用激光器,特別是具有488和514納米強發射能力的氬離子激光器。激光源盡管成本高,但在激光掃描共聚焦顯微鏡中特別有用。有許多不同類型的激光器,每個激光器都提供獨特的發射光譜。圖5顯示了熒光顯微鏡中兩種*常用激光器的發射光譜。

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這種技術以及其多種設備,已被證明是通過巧妙控制離焦光線來渲染非常清晰的熒光圖像的強大工具。這是通過連續掃描和成像極小,淺的區域來完成的。樣品的光學部分存儲在計算機中,并重新組成整個圖像,然后可以在視頻監視器上顯示或使用視頻打印機打印。

燈泡對準 - 顯微鏡公司可能會提供一個可選的對中屏幕,以便將燈泡弧形圖像對準物鏡后孔。該附件在其上端具有標準的皇家顯微鏡學會(RMS)螺紋并且可以擰入到鼻托中。它被放置在那里并旋轉到光路中。配件的下表面有磨砂橙色玻璃,上面刻有十字準線。

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如圖6所示,從分色鏡下來的光線撞擊對中屏幕的內置反射鏡并反射到十字線上。當您操作燈泡聚光旋鈕和燈座上的定心螺絲時,您可以移動圖像,以便它以十字準線為中心(圖7(a))。通過操縱燈管聚光桿,可以使弧形圖像的尺寸變大或變小。當您完成對中附件時,可以用常規物鏡替換它。如果燈箱包含一面鏡子,則應調整鏡子的位置,以使鏡子中的弧形圖像平行并與弧形圖像本身相鄰,如圖7(b)所示。

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如果您沒有對中屏幕,則可以使用以下替代步驟。用10倍物鏡聚焦標本。然后旋轉物鏡轉換頭,使鼻托上的空開口位于顯微鏡的光路中。在舞臺上放置一張白色卡片(代替標本),您將看到投射到卡片上的弧形圖像。通過操作燈電容器旋鈕和燈箱上的燃燒器定心螺釘,可以將弧形圖像對準顯微鏡的光軸。


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